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研究進(jìn)展
PNA探針在微生物檢測領(lǐng)域的運(yùn)用
發(fā)布時間:2017/6/30



目前微生物的檢測手段仍主要依賴于傳統(tǒng)的培養(yǎng)、血清抗體檢測和生化特征鑒等方法, 這些方法存在著操作過程復(fù)雜、繁瑣和耗時長等缺陷, 從而制約了對食源性疾病的監(jiān)測、溯源、鑒定、預(yù)警和控制能力的提高。PCR 技術(shù)具有操作簡便、快速、靈敏度高等特點(diǎn), 是目前研究和應(yīng)用較多的快速檢測方法。但 PCR 方法在近年來的實(shí)踐應(yīng)用中表明, 食品和培養(yǎng)基中存在的抑制劑可影響 PCR 反應(yīng), 使檢測結(jié)果呈假陰性 。盡管人們對PCR方法進(jìn)行了不斷的改進(jìn)和完善, 卻不能有效地阻止假陰性結(jié)果的發(fā)生, 因此當(dāng)今微生物檢測的金標(biāo)準(zhǔn)仍然是傳統(tǒng)培養(yǎng)法。

PNA探針在微生物檢測領(lǐng)域的運(yùn)用并沒有改變傳統(tǒng)的檢測模式, 相反, 將 PNA 探針的高敏感性和特異性應(yīng)用到微生物檢測方法中, 其樣品的前處理, 和某些獲取結(jié)果的方式與傳統(tǒng)的檢測技術(shù)非常相似, 可以直接得到確切的結(jié)果, 無需再進(jìn)行其他檢測。因此, 美國食品和藥物管理局(FDA)推薦肽核酸熒光原位雜交技術(shù)用于快速檢測血液中的某些致病菌。此外, 熒光染料作為PNA 探針直接檢測的標(biāo)記物, 使得檢測方式簡單化, 用不同染料標(biāo)記可以實(shí)現(xiàn)同時對多種微生物的多重分析。與此同時, 自動雜交設(shè)備以及基于標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡載玻片的高精度熒光掃描儀不斷地誕生和更新滿足了高通量篩選微生物的要求,如基于濾膜的 PNA-FISH 結(jié)合掃描技術(shù)可以精確地同時完成對細(xì)菌的檢測鑒定和計(jì)數(shù)。



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